Study Guides (247,934)
Canada (121,177)
Biology (1,099)
BIOL 241 (60)
Final

Biol241 Lab Exam.docx

6 Pages
193 Views
Unlock Document

Department
Biology
Course
BIOL 241
Professor
Barbara Butler
Semester
Winter

Description
Raq Biology 241 Lab Introduction to the Microbial World  1. Direct Microscopic Count of Microorganisms in Milk  Population of milk­ typically  ­ Gram Positive  ­Non Motile  ­Anaerobic rod or cocci  Lactobacillus Micrococcus and Streptococcus  Microscopic; Advantages=  1. Results ASAP  2. Individual bacteria as well clumps can be counted  3. Minimal equipment and cheap  4. Morphological types of bacteria can be determined  5. Slides kept as record    Disadvantages= 1. Not accurate results for low count  2. Dead cells counted  3. Are tiring  4. Easy to confuse debris with bacterial cells  Vortex­ milk samples to completely disperse organisms and bacteria  SlideBrite; used to remove the fat globules *use ethanol to remove  Sample Calculations Microscope Factor  Results; Average # cells per field  Past Date Pasteurization > Raw Milk > Fresh Pasteurized 2. Standard Plate Count of Milk  Advantages vs Microscope Count  1. Only counts viable organisms for low bacterial count  Disadvantages 1. Only detects those utilizing certain nutrients  2. Can be derived from clumps or cells  *** only used to provide estimate in number of total population 37 degrees 48 hours  3. Microbial Analysis of Cheese  Lactic Acid­producing bacteria­  ­Streptococcus  ­Lactobacillus  Organic acids produced are responsible for acidification (SOURING) for flavor  Other microorganisms added to sour milk and enzymes produced cause protein molecules to CURD and  separate  Liquid portion is they whey  3 groups of cheese  soft­ acid curd cheese – cottage and cream cheese  hard­ rennet curd cheese such as swiss and cheddar cheese  semisoft­ rennet curd cheese like camembert  one defect that can occur in cheddar cheese is formation of gas** bc of Clostridium or coliform presence of  E.coli.  Spoilage due to Dairy Molds Geotrichum Cladosporium and Penicillium grow on surfaces of cheese giving dif  flavor  ATP AGAR Permit growth of lactic acid bacteria aka streptococcus and lactobacillus  Cream opaque smooth  EMB AGAR Detects and coliforms that responsible for gas defects in cheese  Green metallic punctiform  MALT AGAR  Cheese that cause mold growth  Opaque blue green fuzzy filamentous  4. Food illness caused by Staphylococci and Salmonellae  Staphylococcus – secreted exotoxin Salmonellae – not secreted endotoxin Staphylococcus – enterotoxin­producing, heat stable toxin into food causing food poisoning.  Salmonellae­ ingestion of pathogenic microorganisms that can grow in the intestinal tract and produce  toxins­ liberation of endotoxin­ LPS outer membrane – intestinal tract  Preliminary Salmonella and Staph Isolation Selinite­Cystine broth (enrichment) ­ Salmonella isolation  Staphylococcus 110­ Staph isolation  (37 48 hours)  Enumeration and Enrichment Staphylococcus  Count colonies on Staphylococcus 110 plate  Opaque colony with smooth margin and white to golden pigmentation  Using a loop­ transfer to BRAIN HEART INFUSION­  ** use electric burner  (37 24h) Detection of Salmonella  Assume no pre­enrichment necessary­ Selective Enrichment and plating Streak loopful of Selenite­cystine culture on MacConkey – used to grow gram negative dif from other  lactose fermentation.  ***Salmonella non lactose fermenting – transparent pink colonies Identification of Staphylococcus by Coagulase  Perform coagulase test add 2 drops of BHI to reconstituted plasma­  Incubate 1­2 hours at 37* look for a clot means positive  Further Detection of Salmonella  Do not ferment lactose­ transparent pink in colour­ MacConkey­ TSI (Triple Sugar Ion) slant  TSI Component  Components of TSI  Observation  Reaction of Majority  Lactose and Sucrose util.  + yellow slant  Negative  ­ colour more red  Dextrose Utilization  + yellow but w/wout gas Positive  but if black­ then YES ­ Colour remains same H2S Production + black into the slant  Positive  ­ No black  Gas Formation + Formation gas pocket in  Positive  medium  ­ no gas  5. Determination of Coliforms in Water by the Most Probable Number Method (MPN Test)  Water should be entirely free from pathogenic microorganisms  Since many pathogens are fecal origin Coliform bacteria used as indicator organisms bc sewage always contains large numbers of them  More easily detected than pathogens­ however not pathogenic their presence just detects fecal matter­ not  harmful microorganisms  Traditional Sequence of Tests  1. Presumptive  inoculating water sample into LAURYL TRYPTOSE BROTH Tubes  If production of gas w in 24­48 hours incubated  Assumed to be contaminated w fecal materials  2. Confirmed  Original tubes w gas within 24­48 hours­ loopful inoculated into tube of brilliant green lactose bile  broth­ **more selective for coliform detection (37 for 48h) Tube has gas­ test is POSITIVE­  Alternate is  Streak culture from from laurel tryptose broth onto EMB agar­ or Endo Agar – if coliform colonies­ w  greenish metallic sheen (E.coli) and Pink colonies dark centre (fish eye) E aerogenes­ are formed on  EMB –  Endo indicates that gas production most likely produced by coliforms  3. Completed  Confirmed test is positive, one usually well isolated coliform colony  Organisms selected gram positive, nonsporeforming bacilli,produce acid and gas from lactose—ie  organisms present in the original sample considered coliforms  A. PRESUMPTIVE TEST  Results  Examine durham tubes of laryl tryptose for gas production, a positive presumptive test one indicating gas  production  Broth is saturated tapping cause evolution in gas  Most Probable Number of coliforms present in sample estimated using index  Various  positive and negative results from 3 proportions are used  B. CONF
More Less

Related notes for BIOL 241

Log In


OR

Join OneClass

Access over 10 million pages of study
documents for 1.3 million courses.

Sign up

Join to view


OR

By registering, I agree to the Terms and Privacy Policies
Already have an account?
Just a few more details

So we can recommend you notes for your school.

Reset Password

Please enter below the email address you registered with and we will send you a link to reset your password.

Add your courses

Get notes from the top students in your class.


Submit